人肝癌原位小鼠動物模型實驗

構(gòu)建人肝癌原位小鼠動物模型是為了模擬人類肝癌的生長和發(fā)展，以便于研究肝癌的發(fā)病機制、藥物篩選和治療策略的評估。

以下是人肝癌原位小鼠動物模型實驗的一般步驟：

  1.選擇合適的小鼠品系：通常選擇免疫缺陷的小鼠品系，如裸鼠（nude mice）或NOD/SCID小鼠，以減少對人肝癌細胞的免疫排斥。

  2.準備肝癌細胞：選擇合適的人肝癌細胞系，如HepG2、Huh-7等，并在體外培養(yǎng)至適宜的密度和傳代。

  3.細胞接種：將肝癌細胞懸液直接注入小鼠的肝臟內(nèi)，通常通過腹腔注射或切開肝臟進行原位接種。接種量需根據(jù)小鼠的大小和預期的腫瘤負荷來決定。

  4.模型監(jiān)控：接種后，定期監(jiān)測小鼠的體重和健康狀況，使用影像學方法（如超聲心動圖）跟蹤腫瘤的生長。

  5.實驗終點：根據(jù)研究目的設定實驗終點，可能是腫瘤體積達到一定大小、小鼠出現(xiàn)明顯癥狀或?qū)嶒烆A定時間到達。

  6.樣本收集：在實驗終點處死小鼠，收集腫瘤組織和相關(guān)器官樣本，進行后續(xù)的組織學和分子生物學分析。

例如：

實驗動物: 裸鼠，雌雄各半，4-6周，18-20g

造模方法: 將Huh-7細胞消化后，收集到一起。無血清的培養(yǎng)基洗滌一次后進行細胞計數(shù)。將計數(shù)好的細胞用無血清的培養(yǎng)基重懸調(diào)整細胞密度待用。采用裸鼠進行腹腔麻醉，取仰臥位固定在手術(shù)板上，常規(guī)皮膚消毒，在裸鼠左肋下作一橫行切口，然后逐層剪開皮膚暴露肝左葉。用細胞懸液,30°角刺入肝臟左葉，緩慢的注入細胞懸液，注射完畢后用無菌紗布輕壓針孔至肝臟表面不再出血，逐層縫合關(guān)腹，待小鼠清醒后放回原飼養(yǎng)環(huán)境。

浙江大學趙斌及梁廷波團隊通過體內(nèi)原位基因編輯技術(shù)建立了25種具有特定基因型的原發(fā)性小鼠肝癌模型，并通過多組學聯(lián)合分析闡明了這些

模型的異質(zhì)性特征。這些模型能夠更好地模擬人類肝癌的多樣性和復雜性，適用于機制研究和臨床前測試。

在建模過程中，應嚴格遵守動物福利和倫理規(guī)定，確保實驗設計的合理性和必要性。在進行實驗前，應獲得相應倫理委員會的批準。

參考

[1]尹君, 李景丁莎, 左從林, 等. 人源性肝癌細胞小鼠原位移植瘤模型的建立及特點的比較研究[J]. 中國比較醫(yī)學雜志, 2018,28(12):68-74.

[2]Tang M, Zhao Y, Zhao J, et al. Liver cancer heterogeneity modeled by in situ genome editing of hepatocytes[J]. Sci Adv, 2022,8(25):eabn5683.