瑞士姬姆薩復(fù)合染色原理

吉姆薩（Giemsa）染色法常用于血液學(xué)、脫落細胞學(xué)和病原生物學(xué)的顯微觀察。該法實際上是一種雙重染色，特點是堿性和酸性染色劑同時著染。其中，堿性染色劑主要為天青II（azure B，天青為亞甲基藍的氧化形式），酸性染色劑為伊紅Y，染色結(jié)果清晰。美中不足是染色后如果常規(guī)脫水會褪色，因此只能晾干封片。這就限制了本法在常規(guī)切片染色中的應(yīng)用。

吉姆薩固體粉劑含有天青II和伊紅Y這兩種染色劑，通常能購買到現(xiàn)成的商品。如果沒有，可將伊紅Y與天青II按一定質(zhì)量比混合，效果相當(dāng)。

根據(jù)經(jīng)驗，染血細胞和某些脫落細胞，伊紅和天青的質(zhì)量比為15 ?4（A型）；如果染一般切片的結(jié)構(gòu)，伊紅與天青的質(zhì)量比為3?4（B型）。如果加入亞甲基藍，伊紅、天青、亞甲基藍的質(zhì)量比為2?1?4（C型），染細胞和切片均可。有時嫌伊紅著色太淺，也可在配制染液時額外補充少量伊紅（配液要用甲醇；有的甲醇純度不夠，可能含有微量乙酸成分，會沉淀部分伊紅）。

吉姆薩染液一般先配制成母液儲存，臨用前用緩沖液稀釋成工作液。

瑞士姬姆薩復(fù)合染色注意事項

配制時，先將吉姆薩粉劑用丙三醇少量多次研磨溶解，然后密閉于60 ℃恒溫箱2 h；加入甲醇并充分混勻后，繼續(xù)放置在37 ℃恒溫箱24 h，然后過濾即為母液。如果無明顯沉淀物，也可直接密閉保存。只要嚴(yán)格密閉、避光，母液的穩(wěn)定性良好，至少可存放5年。保存期間嚴(yán)禁吸潮，否則容易產(chǎn)生沉淀而失效。

臨用前取上述母液，用pH 6.8 ~ 7.0的緩沖液按1? 9（v/v）稀釋并過濾，即為染色工作液。工作液必須在數(shù)小時內(nèi)用完，否則很快產(chǎn)生沉淀，失去染色效力。

具體方法如下：

血液等涂片穩(wěn)固后，須用甲醇充分固定5 ~ 15 min；

→ 稍晾干，浸入吉姆薩工作液染色15 ~ 30 min（根據(jù)標(biāo)本情況預(yù)試確定時間）；

→ 蒸餾水或pH 6.8 ~ 7.0的磷酸鹽緩沖液漂洗涂片1 ~ 3 min；

→ 蒸餾水快速漂洗；

→ 空氣中自然晾干玻片；

→ 滴加中性樹膠，加蓋玻片封固。